Príbeh ľudského života sa začína počatím, spojením genetickej informácie otca a matky. Tento proces vedie k vzniku embrya, ktoré prechádza zložitým vývojom od jednej bunky až po komplexný organizmus. V tomto článku sa pozrieme na to, koľko buniek má embryo v rôznych štádiách vývoja a aké faktory ovplyvňujú jeho kvalitu.
Počatie a zygota
Nový ľudský život sa začína v momente, keď sa genetická informácia obsiahnutá v spermiách otca skombinuje s genetickou informáciou dodanou z vajíčka matky. Zygota je prvým štádiom života embrya, v ktorom sa 23 chromozómov matky kombinuje s 23 chromozómami otca. V tomto momente je určené jedinečné genetické dedičstvo človeka, vrátane jeho pohlavia. Zygota dostáva svoju genetickú informáciu a život z otcových živých spermií a matkinho živého vajíčka.
Delenie embrya a prenos informácií
Embryo sa začne deliť a predstavuje nový, autonómny život. Toto embryo je organizmus, živá bytosť s ľudským genetickým dedičstvom. Embryo sa delí na 2, 4, 8 a viac buniek. Medzi bunkami prebieha prenos informácií, ktorý ukazuje, že embryo sa vnútorne organizuje. Od zygoty k plodu sa všetko vyvíja podľa presného plánu.
Počas nasledujúcich 12-20 hodín po oplodnení dochádza k deleniu vajíčka na dve a pri tom kopíruje svoje DNA. Delí sa ďalej a cestuje súčasne smerom do maternice spolu s vajíčkovodom. Výsledkom ďalšieho delenia, ktoré trvá približne 90 hodín, je morula, ktorá má až 64 buniek. Toto delenie sa tiež nazýva aj ryhovanie. Pod vonkajšou vrstvou buniek sa hromadí tekutina a vzniká tak dutý tvar nazývaný blastocysta. Tá prechádza okolo 5. dňa po oplodnení do maternice, kde sa začína uhniezďovať. Z vnútornej vrstvy buniek blastocysty vzniká tzv. zárodočný terčík, základ budúceho embria. Zo všetkých vzniknutých buniek budú iba niektoré vyvíjať embryo.
Vývoj embrya v kontexte IVF
V rámci cyklov umelého oplodnenia - in vitro fertilizácie (IVF) je zvyčajne možné z vaječníkov získať vyšší počet vajíčok. Tie z nich, ktoré sú zrelé, sa niekoľko hodín po ich odbere z vaječníka oplodnia spermiami a následne ich embryológovia kultivujú v špeciálnych inkubátoroch. Ak oplodnenie prebehne ako má, od nasledujúceho dňa už nehovoríme o vajíčku, ale o embryu.
Prečítajte si tiež: Dávkovanie Burow Ušná Instilácia VULM
Doc. MUDr. Silvia Toporcerová, PhD, medicínska riaditeľka centra Gyncare, upozorňuje: „Väčšina pacientov predpokladá, že zo všetkých odobratých vajíčok budeme mať vhodné embryo na prenos do maternice. Nie je to bohužiaľ pravda. Tak vajíčko, ako aj spermia majú svoje biologické obmedzenia, a nie z každého vznikne zdravé embryo. Časť vajíčok nie je vhodná na oplodnenie, časť z tých vhodných vajíčok sa neoplodní, veľká časť embryí sa počas prvých piatich dní u nás v laboratóriu deliť prestane, a nie sú vhodné na transfer. Je to úplne prirodzený jav.“
Blastocysta a jej štruktúra
V momente, keď sa embryo dodelí do štádia expandovanej blastocysty, a to je 5. - 6. deň po oplodnení, je nutné ho buď preniesť do maternice, alebo zamraziť. V súčasnosti sa vo väčšine cyklov IVF realizuje predĺžená kultivácia embryí do 5. - 6. dňa. Ak má pacientsky pár v tento deň viacero vhodných embryí na transfer do maternice, je potrebné vybrať to najperspektívnejšie embryo.
V embryonálnom štádiu blastocysty sú už bunky embrya rozdelené na embryoblast (inner cell mass - ICM), z ktorého vznikne samotné embryo a trofoektoderm - trofoblast, z ktorého sa vyvinie placenta a plodové obaly. V tomto štádiu má blastocysta niekoľko stoviek buniek.
Gardnerov hodnotiaci systém
V súčasnosti najpoužívanejším systémom morfologického hodnotenia blastocýst je Gardnerov hodnotiaci systém. Zhodnotením týchto troch komponentov embryológovia kombináciou troch znakov udávajú morfologickú kvalitu každej hodnotenej blastocysty. Využívanie Gardnerovho systému je prínosné hlavne preto, že prísne morfologické zhodnotenie minimalizuje mieru subjektivity - teda subjektívneho pohľadu každého jedného embryológa, ktorý embryo pod mikroskopom vidí. Hodnotiace skóre totiž poskytuje presné vyhodnotenie - opis kvality jednotlivých častí blastocysty.
Príklady hodnotenia podľa Gardnerovho systému:
Prečítajte si tiež: Plodová voda a jej vplyv na dieťa
- 6AA - Vyhatchovaná blastocysta, ktorá opustila zónu pellucidu a nachádza sa mimo nej.
- 5AA - Hatchujúca blastocysta, ktorej zväčšujúcim sa tlakom blastocelu praská zóna pellucida a bunky trofoblastu ju opúšťajú .
- 4AA - Expandovaná blastocysta, ktorej objem blastocelu je v porovnaní s blastocystou kvality 3 väčší a zóna pellucida sa viditeľne stenčuje. Embryoblast je kvality A a je tvorený veľkým počtom buniek.
- 3AA - Plná blastocysta, blastocel úplne vypĺňa embryo.
- 4CC - Expandovaná blastocysta, ktorej blastocel vypĺňa celý jej objem a nalieha na zónu pellucidu.
- 3BB - Blastocysta, ktorej blastocel vypĺňa celý jej objem.
Ďalšie faktory ovplyvňujúce výber embrya
Bc. Dominika Remešová, Dis., senior embryologička v centre Gyncare v Košiciach, zdôrazňuje: „Morfologické zhodnotenie blastocysty je však vždy len jednou časťou celej skladačky informácií, ktoré nám pomôžu vybrať to najperspektívnejšie embryo na prenos do maternice. Morfologický obraz embrya je základ, ale okrem toho sú dôležité viaceré ďalšie informácie, ktoré o embryu máme. Je to napríklad pravidelnosť rozdeľovania buniek počas včasného delenia, časová súslednosť jednotlivých delení, percento drobných fragmentov, ktoré pri delení buniek vznikajú. Tých znakov je naozaj veľmi veľa. Pri celkovom zhodnotení nám výrazne pomáha tzv. time-lapsové sledovanie, čo znamená, že v špeciálnom inkubátore, kde sa embryá kultivujú, je umiestnená kamera, ktorá nám niekoľkokrát za hodinu urobí fotografiu každého embrya.“
Predimplantačná genetická diagnostika (PiGD)
Proces mimotelového oplodnenia (IVF) umožňuje vyšetriť embryá v skúmavke ešte pred ich prenesením do dutiny maternice. Vyšetrenie sa obvykle robí vo veľmi včasnom štádiu embryonálneho vývoja odberom 1-2 buniek - blastomér - z trojdenného embrya, ktoré sa vyvíja v podmienkach mimo tela ženy. Predimplantačná genetická diagnostika (PiGD) umožňuje identifikovať embryá bez anomálií vyšetrovaných chromozómov, čím sa zvyšuje vyhliadka mať zdravé dieťa. Je ošetrená zákonom.
PiGD je určená pre:
- IVF pacientkam starším než 35 rokov, pacientkam s opakovanými spontánnymi potratmi, s opakovane neúspešnými IVF cyklami a mužom s ťažkou poruchou plodnosti. U embryí týchto pacientov sa vyšetruje počet kópií chromozómov 13, 15, 16, 18, 21, 22, X a Y. Ich abnormálny počet sa spája s rizikom narodenia postihnutého dieťaťa, opakovaných spontánnych potratov a neúspešných IVF cyklov.
- Párom s vysokým rizikom prenosu genetickej choroby viazanej na pohlavný chromozóm X (napr. hemofília, Duchennova svalová dystrofia a iné). U týchto pacientov sa vyšetruje pohlavie embryí, pričom sa prenášajú embryá nepostihnutého pohlavia.
- Párom s rizikom prenosu chromozómovej patológie (translokácia, inverzia, delécia) na potomkov. Embryá sa vyšetrujú na prítomnosť chromozómovej patológie, ktorú nesie jeden z partnerov.
Vyšetrením blastomér trojdenného embrya sa diagnostikujú poruchy materského i otcovského pôvodu, ako aj novovzniknuté zmeny, ktoré nastali až po oplodnení vajíčka.
Základným predpokladom predimplantačnej genetickej diagnostiky je účasť partnerského páru v IVF programe. Odber 1-2 embryonálnych buniek, čiže biopsia blastomér, sa uskutočňuje na tretí deň v štádiu, keď má embryo ešte len 6 - 10 buniek, všetky majú rovnaký vývojový potenciál a ich odberom sa neporuší ďalší vývoj embrya. Podľa výsledkov genetického vyšetrenia sa pacientke transferujú len tie embryá, ktoré majú normálny počet, t. j. dve kópie vyšetrovaných chromozómov.
Prečítajte si tiež: Kinedryl a deti: dávkovanie
Skúsenosti pacientiek s IVF
Diskusie na fórach o IVF často odhaľujú rôzne skúsenosti pacientiek s počtom buniek v embryách pri ET (embryo transfer) a dňoch, kedy bol ET vykonaný. Napríklad:
- 1. IVF: 4 a 6 buniek, ET na 3. deň po OPU (odber vajíčok).
- 2. IVF: Blastocysty s niekoľko sto bunkami, ET na 5. deň po OPU.
- 3. IVF: 8 buniek, ET na 3. deň po PU (pravdepodobne odber vajíčok).
- 4. IVF: 12 buniek, ET na 4. deň po ET.
Tieto skúsenosti ukazujú, že počet buniek v embryu a deň ET sa môžu líšiť v závislosti od individuálneho priebehu IVF cyklu a rozhodnutí embryológov.